體外培養(yǎng)細胞的增殖活力受多種因素的影響，如某些細胞因子可促進細胞的增殖，而一些藥物如抗癌藥物則可抑制細胞的生長，甚至誘導(dǎo)細胞的死亡。目前，細胞活力檢測方法中，CCK8法是一種方便、靈敏、快速、無放射性、重復(fù)性好檢測方法。

此外，CCK8檢測亦可用于繪制細胞的生長曲線，一定數(shù)量的細胞接種后，連續(xù)測量7天的吸光度，然后將7天測量所得的吸光度值標于坐標紙上，再將各點連成曲線，即可得生長曲線。

包裝清單：

CCK8細胞增殖檢測試劑盒儲存條件：

-20℃保存，二年有效；4℃保存，一年有效

操作說明：

1、細胞活性檢測

① 在96孔板中接種適量的細胞懸液（100ul/孔），在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時；

② 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

③ 繼續(xù)放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-4小時；

④ 用酶標儀測定在450nm的吸光度。

2、細胞增殖-毒性檢測

① 在96孔板中接種適量的細胞懸液（100ul/孔），在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時；

② 在96孔板中加入不同濃度的生長因子、細胞因子或藥物等；

③ 將96孔板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當?shù)臅r間；

④ 向每孔中加入10ul CCK-8溶液；

⑤ 繼續(xù)放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-4小時；

⑥ 用酶標儀測定在450nm的吸光度。

注意事項

1、向96孔板接種細胞時，應(yīng)前后、左右搖晃培養(yǎng)板，使細胞在孔中分布均勻，避免細胞堆集在孔的中央生長。

2、CCK-8 的培養(yǎng)時間一般為 1-4 小時，但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度，根據(jù)細胞種類而定，需要摸索條件，CCK-8 的最佳反應(yīng)時間以具體顯色的最佳時間為準。

3、加入CCK8溶液時避免氣泡的產(chǎn)生，從而影響吸光度。

酶標儀讀取吸光度時可使用430-490nm之間的濾光片，但450nm 濾光片的檢測靈敏度最高。

4、CCK8的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，所以還原劑（例如一些抗氧化劑）會干擾檢測，如干預(yù)因素具有還原性，應(yīng)在檢測前通過換液的方法予以去除。

5、培養(yǎng)基中酚紅對吸光度的影響，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消除，因此，不會對檢測結(jié)果造成影響。

6、所測吸光度值范圍應(yīng)在0.4-2之間，此范圍內(nèi)的吸光度值與細胞的數(shù)量與活力之間的線性關(guān)系較為明顯，如果超出此范圍，應(yīng)相應(yīng)增加或減少接種細胞的數(shù)量。

備注：

         產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級，請以實際標簽信息為準。

本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。

為了您的安全和健康，請在實驗過程中做好防護工作。